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Tiffany E Co montaggio sono stati preparati Serie focale

Tiffany E Co

Tridimensionali (3D) mappe di proteine ​​nel contesto di cellule intere sono importanti per studiare la funzione cellulare. Tuttavia, ricostruzioni 3D di cellule intere sono difficili da ottenere con i convenzionali microscopia elettronica a trasmissione (TEM). Descriviamo una metodologia per determinare le posizioni 3D di proteine ​​marcate con nanoparticelle d'oro sulle cellule eucariotiche intere. Il fattore di crescita epidermico recettori sulle cellule COS7 Gioielli Tiffany Argento sono stati etichettati con nanoparticelle d'oro, e critico-point essiccati campioni di cellule tutto il montaggio sono stati preparati. Serie focale 3D sono stati ottenuti con la trasmissione scansione aberrazione corretta microscopia elettronica (STEM), senza inclinare il campione. La risoluzione assiale è stato migliorato con la deconvoluzione. Le posizioni verticali delle nanoparticelle in una cella montaggio intero sono stati determinati con una precisione di 3 u0026 nbsp; nm. Dall'analisi della variazione delle posizioni assiali delle etichette abbiamo concluso che la superficie cellulare è stata arruffava. Per ottenere una sufficiente stabilità del campione in elettroni irradiazione durante la registrazione della serie focale, il campione è stato rivestito di carbonio. Un metodo quantitativo è stato sviluppato per analizzare la stabilità della ultrastruttura dopo irradiazione con Tiffany E Co fasci di elettroni mediante TEM. I risultati di questo studio dimostrano la possibilità di utilizzare STEM aberrazione corretta per studiare la distribuzione delle nanoparticelle 3D in cellule intere.
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